第一作者:胡月(1994-),女,山西大同人,在读本科生,主要研究方向为植物生理学。E-mail:[email protected]
以桑树( Morus alba)为材料,研究了桑树叶片气体交换参数的日变化对不同pH模拟酸雨的响应特点,旨在揭示酸雨对植物光合生产力的影响机制。结果表明,无酸雨处理(CK)的桑树叶片净光合速率的日变化,出现明显的“光合午休”现象,而模拟酸雨处理却明显提高了桑树叶片午休期间的净光合速率。在“光合午休”期间,CK的气孔导度和气孔限制值下降,而胞间CO2浓度升高,经相关性分析,此时净光合速率与胞间CO2浓度呈显著负相关( P<0.01),说明此时净光合速率下降可能是由CO2同化受到抑制导致的,而各模拟酸雨处理下的相应参数的变化趋势与CK相同,其中胞间CO2浓度低于CK,而气孔导度值高于CK,说明模拟酸雨处理可促进桑树叶片光合午休期间的气孔开度和CO2同化。大气温度与蒸腾速率、叶面饱和水汽压亏缺均呈显著正相关,而与大气相对湿度呈显著负相关,在光合午休期间,大气相对湿度接近全天最低值,说明桑树叶片CO2同化受到抑制的主要原因在于水分的匮乏,pH≥4.5模拟酸雨各处理的蒸腾速率、气孔限制值和叶面饱和水汽压亏缺都高于CK,而水分利用效率与CK差异不显著( P>0.05),说明模拟酸雨可促进桑树叶片光合作用过程的水分供应。pH 3.5模拟酸雨处理的光合日同化量、日均净光合速率和气孔导度均显著低于CK( P<0.05),而pH 4.5和pH 5.6处理中的相应参数值均高于CK。以上结果说明,pH≥4.5的模拟酸雨对桑树光合作用具有明显促进作用,在酸雨轻度污染区域,可将桑树作为退耕还林和园林绿化植物用以吸收大气中的SO2或氮氧化物,以适应或减轻大气酸雨污染。
In the present study, the response characteristics of gas exchange parameters for the diurnal variation of the mulberry leaf to simulated acid rain with different pH have been studied to reveal the mechanism and the effects of simulated acid rain on plant photosynthetic productivity. The results showed that net photosynthesis rate (Pn) present obviously photosynthetic depression at midday in treatment of CK (no acid rain), while three treatments of simulated acid rain could increase Pn at midday. During photosynthetic noon-break, stomatal conductance (Gs) and stomatal limitation value (Ls) decreased, but the intercellular CO2 concentration(Ci) increased, the results of correlation analysis showed that Pn and Ci was significantly negative correlation, which indicated that CO2 assimilation have been inhibited. The corresponding parameters under acid rain treatments showed similar change trends with CK excepted with that the Ci was lower than that of CK, and Gs was higher than CK, indicating that the simulated acid rain treatments could promote stomatal opening and CO2 assimilation of mulberry leaf during midday depression. Atmospheric temperature (T) significantly positively correlated with leaf saturation water vapor pressure deficit (Vpdl) and transpiration rate (Tr), respectively. However, there was significant negative correlation between T and atmospheric relative humidity (RH). Meanwhile,the value of RH was near the minimum value during midday depression of photosynthesis, which indicated that CO2 assimilation inhibition most come from water shortage. While Tr, Gs and Ls in treatments of simulated acid rain with pH≥4.5 were higher than that of CK, and the water use efficiency (WUE) in simulated acid rain had no significant difference with CK which indicated that simulated acid rain could promote mulberry leaf intercellular water supplying. In treatments of simulated acid rain with pH 3.5, the photosynthetic assimilation total (PT), average Pn and Gs were significantly lower than that of CK, while the corresponding parameters of pH 5.6 and pH 4.5 were higher than that of CK. These results suggested that treatments of simulated acid rain with pH≥4.5 had significant promoting effects on the photosynthesis of mulberry. In the region with mild acid rain pollution, the mulberry could be employed as plants for returning farmland to forest and landscape to absorb atmospheric SO2 and nitrogen oxides and adapt or lighten the atmosphere of acid rain pollution.
由工业化生产和人类活动而产生的SO2和NOx, 在大气或水滴中转化为硫酸和硝酸所致pH< 5.6的酸化雨、雪、雾和露等统称为酸雨[1]。酸雨是当今全球三大环境问题之一[2], 而中国是目前世界上继欧洲和北美之后出现的第三大酸雨覆盖区域, 据统计中国境内受污染的地区约占国土总面积的40%[3], 近年来随着我国经济的发展, 受酸雨影响的面积逐年扩大, 酸雨危害越来越严重。在今后相当长时间内, 酸雨和环境酸化问题仍将继续存在, 控制酸雨和全球酸化是人类走向持续发展进程中必须解决的一个重大环境问题[2]。S
供试“ 秋雨桑” 为一年生实生桑苗, 由黑龙江省蚕业研究所提供, 试验于2014年4月28日在东北林业大学日光温室的酸雨棚中进行, 为排除所用培养土之间差异的影响, 将培养土均匀混合后再装盆, 为确保试验材料的相对一致性, 移栽前对桑苗进行修剪, 主茎和主根长度分别保留3 cm, 幼苗移栽到的培养钵(15 cm× 18 cm)中, 每钵定植3株, 共25钵。待供试苗木长到30~40 cm, 即2014年6月初, 选择长势相对一致的20钵进行模拟酸雨处理。
根据黑龙江酸雨检测分析资料[5], S
光合日变化测定:选取长势较均匀一致的桑树苗, 其主干自上向下第4片完全展开叶, 利用Li-6400便携式光合仪(LiCOR inc, USA)测定光合气体交换参数:诸如净光合速率(Pn), 蒸腾速率(Tr), 气孔导度(Gs), 胞间CO2浓度(Ci), 同时记录大气温度(T), 光合有效辐射(PAR), 大气CO2浓度(Ca)和大气湿度(RH)等环境因子的变化。并利用公式:
Ls=1-Ci/Ca,
WUE=Pn/Tr.
分别计算气孔限制值(Ls)和水分利用效率(WUE), 1 d之中光合日同化总量(PT), 计算公式为:
PT=∑ [(Pi+1+Pi)÷ 2× (ti+1-ti)× 3 600÷ 1 000].
式中, PT(mmol· m-2· d-1)为测定当天的光合同化总量, Pi(μ mol· m-2· s-1)指初测点的瞬时净光合速率, Pi+1(μ mol· m-2· s-1)为下一测点的瞬时净光合速率; ti(h)为初测点的瞬时时间, ti+1(h)为下一测点的时间, j为测试次数, 3 600指每小时3 600 s, 1 000指1 000 μ mol[23]。
利用DPS 7.05软件对试验数据进行统计分析, 运用Excel 2003进行绘图。图中数据均为5次重复的平均值± 标准差(SD), 采用单因素方差分析(One-way ANOVA)和最小显著差异法(LSD)比较不同数据组间的差异。
光合有效辐射(PAR)和大气温度(T)日变化均呈典型单峰曲线, 但高峰出现的时段不同(图1)。PAR在11:00左右达到峰值为1 400 μ mol· m-2· s-1, 而T在14:00时左右达到最大值, 为36 ℃, 此时大气饱和水汽压亏(Vpd)最高为3.56 kPa, 且Vpd的日变化同T的日变化曲线趋势大体一致, 峰值出现的时间为14:00左右, 两者呈显著的正相关, 相关系数为0.92(P< 0.01)(表1)。两者最高值均滞后于PAR最高值。大气相对湿度(RH)在一天中的变化规律先下降后上升, 与T和Vpd呈负相关, 相关系数分别为-0.98(P< 0.01)和-0.94(P< 0.01)。
![]() | 表1 环境因子与光合参数的相关关系 Table 1 Correlation of environment factors with parameters of photosynthesis |
未喷施酸雨的处理(CK)的桑树叶片净光合速率(Pn)的日变化情况为典型的“ 双峰曲线” (图2), 在中午, 光合作用受到抑制, 出现明显的“ 光合午休” 现象, 而各酸雨处理桑树叶片在光合午休期间的Pn下降幅度明显小于CK, pH 5.6、pH 4.5和pH 3.5处理的Pn值, 分别比CK高84.59%、67.84%和76.72%, 且差异极显著(P< 0.01), 而各酸雨处理间的Pn值差异不显著(P> 0.05)。CK的蒸腾速率(Tr)在上午处于缓慢上升趋势, 10:00之后小幅下降, 12:00之后逐渐升高, 最高峰出现在14:00左右, 而酸雨各处理的Tr在08:00左右较CK低, 而在10:00-12:00其值远高于CK, 尤其是在“ 光合午休” 期间, pH 5.6、pH 4.5和pH 3.5酸雨处理的桑树叶片的Tr极显著高于CK(P< 0.01), 分别高出103%、63.51%和21.60%。而pH 3.5酸雨处理的Tr在各时间点均明显低于其他酸雨处理, 尤其是在下午最高峰期间甚至低于CK处理, 且差异显著(P< 0.05)。
除pH 3.5酸雨处理外, 其余各酸雨处理的桑树叶片气孔导度(Gs)的日变化趋势大体相似(图3), 但在上午出现高峰时段不同, CK的第1次高峰出现在08:00, 而后就开始下降, 尽管此时各酸雨处理的Gs低于CK, 但却逐渐上升, 在10:00左右, pH 5.6和pH 4.5处理的Gs分别较CK高出77.51%和38.13%, 差异显著(P< 0.05), 在“ 光合午休” 期间, pH 5.6处理的Gs值远远大于其他处理, 且差异达到极显著水平(P< 0.01), 在14:00以后酸雨处理的Gs开始逐渐下降。各试验处理桑树叶片胞间CO2浓度(Ci)日变化呈现“ 下降-上升-下降-上升” 的W线型趋势, 自06:00开始, 其值随着时间的推移逐渐下降, 并在10:00左右降到第1次低谷, 而在“ 光合午休” 期间略微上升, 之后再次下降, 于14:00左右达到第2次低谷, 而后随着时间的延续逐渐升高。其中, pH 5.6的酸雨处理的Ci值, 在主要时段中均高于其他处理, 且较其他处理差异显著, 而其余处理间Ci值差异不显著(P> 0.05)。在午休期间CK的Gs值下降而Ci值升高, 气孔限制值Ls下降, 说明桑树“ 光合午休” 时, Pn的下降可能是由于气孔因素及CO2同化受到抑制共同引起的。而pH 5.6、pH 4.5和pH 3.5酸雨处理桑树叶片的Gs, 在“ 光合午休” 时较CK分别高出82.3%、35.8%和14.6%(P< 0.01), 而相应的Ci值较CK分别低14.61%、20.52%和21.27%(P< 0.01), 相应的Ls值较CK分别高出7.6%、47.6%和50.18%(P< 0.01)。以上结果充分说明模拟酸雨可有效促进气孔开度及CO2同化进程。
各处理水分利用效率(WUE)和叶面饱和水汽压亏缺(Vpdl)的日变化均呈现相同的规律(图4), 而各处理WUE在全天出现最高值的时间点不相同, CK的WUE最高值出现在10:00左右, 而酸雨处理的WUE最高值出现较CK的提前, 在08:00左右, 除了10:00外, pH 3.5酸雨处理的WUE值在其他各时段均高于其他各处理且差异显著(P< 0.05), 其余各处理的WUE值变幅情况基本一致, 即在“ 光合午休” 期间略有下降, 而后随时间的延续在16:00之前变幅不大, 且处理间差异不显著(P> 0.05)。CK、pH 5.6和pH 4.5的Vpdl最高值出现在14:00左右, 日变化呈单峰曲线; 而pH 3.5酸雨处理的Vpdl的日变化呈双峰曲线, “ 光合午休” 期间pH 3.5的Vpdl略高于CK, 且差异不显著(P> 0.05)。
pH 5.6和pH 4.5酸雨处理桑树光合日同化量(PT)分别较CK高出4.55%(P< 0.05)和2.53%(P> 0.05), 而pH 3.5酸雨处理的较CK低3.16%(P> 0.05)(表2)。Pn、Tr和Ci日变化的平均值在各处理中的变化趋势基本一致, 大小顺序为pH 5.6> pH 4.5> CK> pH 3.5, 且除Ci外各酸雨处理间差异显著。pH 3.5酸雨处理的Gs和Vpdl日平均值最低, 且GS与其他处理差异显著(P< 0.05)。酸雨处理的WUE日平均值显著高于对照, pH 3.5、pH 5.6和pH 4.5处理的WUE分别较CK高出123.26%、37.98%和24.03%(P< 0.05)。说明pH 3.5酸雨处理虽明显提高了桑树叶片的WUE, 但降低了其他气体交换参数值, 使得该处理桑树叶片光合能力显著降低。
![]() | 表2 喷施不同pH值酸雨的桑树叶片光合参数均值 Table 2 Mean value of photosynthesis parameters under acid rain with different pH values |
将酸雨处理的桑树叶片的气体交换参数与主要环境因子做相关性分析(表1), 主要环境因子之间的相关性主要表现在, PAR与Pn、Tr、Vpdl及T均呈极显著正相关(P< 0.01), 相关系数分别为0.93、0.89、0.88和0.86, 而与Ci和RH分别呈极显著负相关(P< 0.01), 相关系数分别为-0.88和-0.86。T与Tr、Vpdl呈极显著的正相关(P< 0.01), 相关系数分别为0.93和0.98, RH与Tr和Vpdl呈极显著的负相关(P< 0.01), 相关系数分别为-0.90和-0.98, 而T对桑树叶片Vpdl的影响最大, 进而影响Tr。Gs与Pn正相关但不显著(P> 0.05), 由此得知, T、RH和PAR是影响桑树叶片Pn和Tr日变化的主要环境因子。另外, Pn与PAR的相关系数高于其与其他环境因子的相关系数, 这说明PAR对桑树叶片Pn的影响最大。Pn与Ci呈极显著的负相关(P< 0.01), 相关系数-0.93, 且Pn与Ci的相关系数高于Pn与其他光合参数的相关系数; 同时Pn与Tr呈极显著的正相关(P< 0.01), 相关系数为0.89。而Tr与Gs呈显著正相关(P< 0.05), 相关系数为0.84。在这本试验中T与Pn、Gs和Ci的相关性不显著(P> 0.05), 说明桑树叶片的光合作用对夏季高温不敏感, 具有一定的耐高温特性。
植物光合作用的日变化是植物生命周期中重要的基本活动, 人们通过植物光合日变化情况可分析植物自身因素与外界因子对其光合作用的影响[25]。本研究发现, 桑树净光合速率的日变化情况同课题组前期研究结果一致[24], 即呈典型“ 双峰曲线” , 在12:00-13:00期间, Pn下降表现出明显的“ 光合午休” 现象, 这与扁桃(Amygdalus communis)叶片净光合速率日变化趋势相似[26]。在本研究中, 模拟酸雨可显著缓解桑树叶片光合午休现象, 而付晓萍等[27]研究发现, 经酸雨处理的樟树(Cinnamomum camphora)叶片的光合午休现象加剧, 研究结果不同的原因可能在于:一是不同植物对酸雨的响应不同; 二是施用模拟酸雨的量不同; 三是施用酸雨成分不同。而植物的“ 光合午休” 现象已成为物质生产的限制因素之一, 气孔因素、光合酶活性、光合产物运输及光呼吸等各环节的异常, 都可能导致植物叶片光合午休, 而采取栽培措施可明显缓解植物的光合午休现象, 朱文旭等[28]研究桑树/谷子(Setaria italical)间作, 可通过提高气孔导度和水分利用率来缓解桑树叶片光合午休现象; 张会慧等[29]发现施肥也可明显缓解桑树叶片光合午休, 且施用农家肥效果好于化肥, 机理在于农家肥提高桑树叶片的实际光化学效率, 减少光抑制。本研究中, 各处理的Gs、Tr和Ls日变化的趋势大体相似, 即“ 上升-下降-上升-下降” , 而各处理的Ci日变化的趋势一致且与Gs、Tr和Ls相反, 即“ 下降-上升-下降-上升” 。在“ 光合午休” 期间, 各模拟酸雨处理的Gs、Tr和Ls值均高于CK, 同时Ci上升的幅度均明显小于CK, 相关性分析结果表明Ci和Gs之间呈负相关, 但相关性不显著。依据Farquhar和Sharkey[30]的理论分析, 认为桑树叶片“ 光合午休” 期间, Pn的下降可能是由气孔因素和CO2同化受到抑制共同引起的, 而pH≥ 4.5的模拟酸雨处理可明显缓解这两个限制因素对Pn的影响。pH≥ 4.5各酸雨处理桑树Vpdl日变化呈单峰曲线, 高峰出现的时间大体一致, T是在同时段出现最高峰, 说明是高温引起叶片内部水蒸气密度上升, Vpdl增加。在“ 光合午休” 期间, pH 4.5和pH 5.6的酸雨处理桑树叶片的WUE值低于CK, 而Vpdl值高于CK, Pn值高于CK, 说明pH≥ 4.5的酸雨处理桑树叶片可能通过调控细胞水分代谢, 进而提高叶片光合能力。氮素被誉为生命元素, 尤其是对枝叶蛋白含量较高的桑树生长至关重要, 许楠等[31]发现, 硝态氮和铵态氮配合施用有利于桑树幼苗的生长和光能利用效率, 逄好胜等[32]研究发现增施N
本研究发现, pH≥ 4.5模拟酸雨有利于桑树Pn和Tr的增加, 这与付晓萍等[27]及金余和金静[33]研究阔叶树幼苗和针叶树幼苗对酸雨胁迫都具有一定的适应和缓冲能力的结果相一致。酸雨中的主要成分含有S
在对环境因子与光合参数进行相关性分析时, 主要环境因子之间的相关性主要表现在, 太阳有效辐射(PAR)与温度(T)呈显著正相关, 而两者同时与大气相对湿度(RH)呈显著负相关, 这与前人的研究结果相同[26, 40]。同时发现, T与Tr呈显著正相关, PAR与Pn和Tr呈显著正相关; 而RH与Vpdl和Tr呈显著负相关。因此可知, T、RH和PAR是影响桑树叶片Pn和Tr日变化的主要因素, 另外, Pn与PAR的相关系数高于其与他环境因子的相关系数; Pn与Ci的相关系数高于其与其他参数的相关系数; Tr与Vpdl的相关系数高于其与其他参数的相关系数, 这说明PAR对桑树叶片Pn的影响最大, 而T对桑树叶片Vpdl的影响最大, 其次是Tr。在这本研究中, T与Pn、Gs和Ci的相关性不显著, 说明桑树对夏季高温不敏感, 具有一定的耐热性, 而玄明君[41]认为, 年均气温上升是黑龙江省未来气候变化的主要趋势, 桑树在未来的夏季高温中具有种植优势。
大气温度、相对湿度、光合有效辐射及Gs均与Tr呈显著相关, 是影响桑树光合作用和蒸腾作用日变化的主要因素, pH≥ 4.5的酸雨对桑树光合性能具有良好的促进作用, 而在 pH≤ 3.5的模拟酸雨胁迫下, 桑树叶片的光合作用才受到明显的影响。本研究结果表明, 酸雨对桑树造成伤害的阀值在pH 3.5左右, 远小于黑龙江省自然沉降酸雨的pH 值(pH 5), 表明桑树对黑龙江省温度逐年升高及酸雨频发等环境条件具有适应性, 可以将其作为园林绿化、退耕还林及植被构建的经济树种进行大面积种植。
The authors have declared that no competing interests exist.
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