犊牛出生后, 将犊牛置于笼中进行单栏饲养。根据随机分配的原则将40头新出生的荷斯坦犊牛, 按出生日期依次交替分为试验组和对照组, 每组各20头。保持牛舍干燥卫生、不潮湿, 饲草料不霉变, 饮水清洁、卫生, 所饲喂的牛奶和饮水控制温度, 不使犊牛产生应激反应, 并每周用3%新洁尔灭或2%高锰酸钾溶液对饲槽、牛床、体表等进行消毒。保持舍内阳光充足、通风良好、空气清新, 符合卫生标准^[21]。

犊牛出生记为第0天, 在0-2日龄饲喂初乳, 早晚各一次, 每天提供足量饮水。

3日龄开始饲喂全脂乳, 3-10日龄每天喂2次, 每次2 L; 从3日龄起提供精饲料, 供其自由采食。

11-35日龄每天饲喂全脂乳2次, 每次3 L。

36-42日龄每天仅在早上喂1次全脂乳, 每次3 L。

43日龄断奶, 只提供饮水、精饲料至70日龄。

在试验组犊牛精料中按40 g· t^-1的比例加入牛至精油, 记录试验组和对照组犊牛相应时间段的生长情况:分别在0、14、28、42、56、70日龄测量犊牛体重、体高、体长、胸围、腹围、管围。分别在0、2、14、28、42、56、70日龄采血测免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)和血清总蛋白(TP)含量。

每日观察犊牛的粪便, 并根据Wisconsin大学犊牛健康评分表^[22]对粪便在15分依照视觉做出评分(1 分为僵硬, 3分为正常, 5分为稀粥状, 水样物)。

测量每天犊牛精料采食量。

在本次试验中所有犊牛均采用相同的精料配方进行饲喂, 其配方如表1所列。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 犊牛精饲料配方表 Table 1 Calf feed composition 原料 Ingredient 使用量 Application amount/kg 干物质 Dry matter/kg 干物质百分比 Dry matter content/% 营养成分 Nutritional composition 粉碎玉米Corn 50.31 44.27 88.00 泌乳净能Nel/(MJ· kg-1) 0.84 糖蜜Molasses 4.00 3.08 77.00 粗蛋白CP/% 24.24 豆粕Soybean meal 43% 30.00 29.40 98.00 酸性洗涤纤维 ADF/% 7.86 蒸馏脱水玉米Corn distl 10.00 9.40 94.00 中性洗涤纤维 NDF/% 17.55 油菜粕Rapeseed meal 2.00 1.84 92.00 脂肪Fat/% 4.73 盐Salt 0.10 0.10 99.00 蛋氨酸 Met/% 1.91 大豆油Oil, soybean 1.00 0.94 94.00 赖氨酸Lys/% 6.63 预混料① Premix 2.59 2.56 98.58 钙 Ca/% 0.79 总计/kg 100.00 91.59 91.59 磷 P/% 0.46 硒 Se/% 0.33 注:1)每千克预混料含有VA≥ 650 IU, VD≥ 1 000 IU, VE≥ 444 IU, Fe≥ 152 mg, Cu≥ 18 mg, Zn≥ 61 mg, Mn≥ 61 mg, Se≥ 0.45 mg, I≥ 0.38 mg, Co≥ 0.15 mg。2)综合净能为计算值, 根据中国《肉牛饲养标准》(NY/T815-2004)计算而来, 其余为实测值。 Note:1) One kilogram of premix contained the following: VA≥ 650 IU, VD≥ 1 000 IU, VE≥ 444 IU, Fe≥ 152 mg, Cu≥ 18 mg, Zn≥ 61 mg, Mn≥ 61 mg, Se≥ 0.45 mg, I≥ 0.38 mg, Co≥ 0.15 mg.2)NEmf was a calculated value according to China Feeding Standard of Beef Cattle(NY/T815-2004), while the others were measured values.

表1 犊牛精饲料配方表 Table 1 Calf feed composition

牛至精油来源于美国RALCO NUTRITION公司; 犊牛精料来源于甘肃三洋金源农牧股份有限公司。

试验数据均采用Microsoft Excel进行统计, 试验结果以平均值± 标准差表示, 使用SPSS 19.0软件对数据进行ANOVA单因素方差分析和重复测量方差分析。

试验组与对照组犊牛在0日龄体重、体高、体长、胸围、腹围、管围差异均不显著(P> 0.05), 各项数据在试验期内差异逐渐明显, 至42日龄后各项数据差异均为显著(P< 0.05)(表2)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 犊牛生长状况数据单因素方差分析结果 Table 2 Results of single factor analysis of variance in growth status of calves 项目 Item 处理 Treatment 0日龄 0 day-old 14日龄 14 day-old 28日龄 28 day-old 42日龄 42 day-old 56日龄 56 day-old 70日龄 70 day-old 体重 Weight/kg 试验组 Experience group 43.65± 4.44 51.15± 4.40 61.75± 4.45A 73.85± 4.60A 88.05± 5.10A 104.20± 4.55A 对照组 Control group 42.25± 3.97 49.25± 4.01 58.15± 4.04B 69.40± 4.02B 82.30± 4.16B 96.65± 4.38B 体高 Height/cm 试验组 Experience group 84.50± 3.61 86.60± 3.65 89.70± 3.73A 92.70± 3.59A 96.70± 3.51A 101.85± 3.96A 对照组 Control group 82.10± 4.04 84.05± 4.02 86.20± 4.06B 89.20± 4.12B 92.25± 3.89B 96.15± 4.09B 体长Body length/cm 试验组 Experience group 83.30± 5.20 85.25± 5.18 89.30± 5.11A 93.40± 5.03A 98.35± 5.17A 104.55± 5.54A 对照组 Control group 80.90± 4.62 82.95± 4.62 85.95± 4.55B 90.05± 4.68B 93.95± 4.56B 98.85± 4.42B 胸围Chest circumference/ cm 试验组 Experience group 81.75± 3.13 84.70± 3.15 86.85± 3.25 90.80± 3.17a 96.05± 3.33A 101.75± 3.11A 对照组 Control group 80.50± 3.07 83.45± 3.03 85.60± 3.10 88.60± 3.14b 92.90± 3.57B 97.45± 3.14B 腹围 Abdominal circumference/ cm 试验组 Experience group 79.75± 3.65 82.70± 3.60 85.85± 3.63a 89.80± 3.44A 98.15± 3.50A 103.40± 3.72A 对照组 Control group 78.60± 3.57 81.50± 3.66 83.80± 3.87b 86.85± 3.44B 92.45± 3.69B 96.60± 3.80B 管围 Pastern/cm 试验组 Experience group 11.25± 1.02 11.25± 1.02 11.35± 1.18 12.25± 1.02A 13.30± 1.03A 14.10± 1.12A 对照组 Control group 10.80± 0.95 10.80± 0.95 10.80± 0.95 11.20± 0.89B 12.05± 1.00B 12.80± 0.95B 注:同一项目同列不同小写字母表示试验组与对照组差异显著(P< 0.05), 同列不同大写字母表示试验组与对照组差异极显著(P< 0.01), 无字母表示差异不显著。下同。 Note: Different lowercase letters within the same column indicate significant difference between at the 0.05 level; Different capital letters with same column indicate significant differences between at the 0.01 level, no letter indicate no significant difference. similarly for the following tables.

表2 犊牛生长状况数据单因素方差分析结果 Table 2 Results of single factor analysis of variance in growth status of calves

犊牛体重、体高、体长、胸围、腹围、管围等生长状况数据的重复测量方差分析结果如表3所列。日龄和添加牛至精油均对犊牛生长状况有极显著影响(P< 0.01), 二者交互作用有显著影响(P< 0.05)。

犊牛血清免疫数据按犊牛0、2、14、28、42、56、70日龄的血清总蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M等数据进行分析, 其分析结果如表4所列。试验组与对照组犊牛在0日龄和2日龄血清总蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M均差异不显著(P> 0.05), 各项数据在试验期内差异逐渐明显, 至42日龄及以后各项指标均差异极显著(P< 0.01)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 犊牛生长状况数据重复测量方差分析结果 Table 3 Results of repeated-measures analysis of variance in growth status ofcalves 项目 Item 处理 Treatment 日龄Day-old 处理Treatment× 日龄Day-old 体重Weight < 0.01 < 0.01 < 0.01 体高Height < 0.01 < 0.01 < 0.01 体长Body length < 0.01 < 0.01 0.02 胸围Chest circumference < 0.01 < 0.01 < 0.01 腹围Abdominal circumference < 0.01 < 0.01 < 0.01 管围Pastern < 0.01 < 0.01 0.01

表3 犊牛生长状况数据重复测量方差分析结果 Table 3 Results of repeated-measures analysis of variance in growth status ofcalves

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 犊牛血清中免疫球蛋白含量单因素方差分析分析结果 Table 4 Analysis of immunoglobulin levels in sera ofcalves by single-factor analysis of variance 项目 Item 处理 Treatment 0日龄 0 day-old 2日龄 2 day-old 14日龄 14 day-old 28日龄 28 day-old 42日龄 42 day-old 56日龄 56 day-old 70日龄 70 day-old 血清总蛋白 TP/(g· L-1) 试验组 Experience group 45.05± 2.70 47.40± 2.56 50.10± 2.73 53.30± 2.74 57.20± 3.12A 62.15± 2.68A 66.25± 2.65A 对照组 Control group 45.90± 2.81 48.65± 2.94 50.90± 2.81 52.15± 2.52 54.20± 2.55B 57.15± 2.37B 60.35± 2.56B 免疫球蛋白 G IgG/ (mg· dL-1) 试验组 Experience group 111.80± 5.22 132.90± 5.30 117.15± 5.26A 99.00± 5.21A 122.15± 5.11A 140.40± 5.03A 161.50± 5.20A 对照组 Control group 111.85± 5.97 132.85± 6.33 110.85± 5.75B 86.70± 5.60B 105.00± 6.32B 118.75± 5.66B 135.70± 6.06B 免疫球蛋白 A IgA/ (mg· dL-1) 试验组 Experience group 4.60± 1.90 16.95± 1.99 13.65± 1.95 8.95± 2.04A 16.85± 2.28A 26.90± 2.17A 38.40± 2.37A 对照组 Control group 4.85± 1.87 17.80± 2.09 13.15± 3.48 5.80± 1.85B 12.20± 1.99B 20.05± 2.24B 28.95± 1.96B 免疫球蛋白 M IgM/ (mg· dL-1) 试验组 Experience group 10.00± 3.32 30.35± 3.20 22.35± 3.31A 11.30± 3.39A 16.40± 3.30A 23.70± 3.71A 32.05± 3.15A 对照组 Control group 10.75± 2.88 30.05± 2.86 19.75± 2.83B 5.90± 2.90B 9.00± 2.73B 14.15± 2.87B 21.05± 2.76B

表4 犊牛血清中免疫球蛋白含量单因素方差分析分析结果 Table 4 Analysis of immunoglobulin levels in sera ofcalves by single-factor analysis of variance

犊牛血清总蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M等数据的重复测量方差分析结果如表5所列。日龄、添加牛至精油以及二者交互作用均对犊牛血清中免疫蛋白含量有极显著影响(P< 0.01)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 犊牛血清中免疫球蛋白含量数据重复测量方差分析结果 Table 5 Results of repeated-measures analysis of the variance of serum immunoglobulin levels in calves 项目 Item 处理 Treatment 日龄 Day-old 处理Treatment× 日龄Day-old 血清总蛋白TP P< 0.01 P< 0.01 P< 0.01 免疫球蛋白G IgG P< 0.01 P< 0.01 P< 0.01 免疫球蛋白A IgA P< 0.01 P< 0.01 P< 0.01 免疫球蛋白M IgM P< 0.01 P< 0.01 P< 0.01

表5 犊牛血清中免疫球蛋白含量数据重复测量方差分析结果 Table 5 Results of repeated-measures analysis of the variance of serum immunoglobulin levels in calves

犊牛平均采食量是将犊牛一周内的采食量进行平均计算然后再进行数据分析, 其分析结果见表6。试验组与对照组犊牛平均采食量在37日龄差异不显著(P> 0.05), 在1570日龄差异极显著(P< 0.01), 在814日龄差异显著(P< 0.05)。

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 犊牛每周平均采食量(kg)分析结果 Table 6 Results of weeklyanalysis of average feed intake (kg) of calves 处理 Treatment 3-7日龄 3-7 day-old 8-14日龄 8-14 day-old 15-21日龄 15-21 day-old 22-27日龄 22-27 day-old 29-35日龄 29-35 day-old 试验组Experimental group 0.03± 0.01 0.16± 0.02a 0.28± 0.02A 0.47± 0.06A 0.84± 0.09A 对照组Control group 0.02± 0.01 0.14± 0.02b 0.25± 0.03B 0.41± 0.07B 0.75± 0.09B 处理 Treatment 36-42日龄 36-42 day-old 43-49日龄 43-49 day-old 50-56日龄 50-56 day-old 57-63日龄 57-63 day-old 64-70日龄 64-70 day-old 试验组Experimental group 1.39± 0.03A 1.93± 0.04A 2.37± 0.07A 2.72± 0.08A 3.11± 0.11A 对照组Control group 1.30± 0.04B 1.83± 0.04B 2.25± 0.04B 2.60± 0.06B 2.95± 0.09B

表6 犊牛每周平均采食量(kg)分析结果 Table 6 Results of weeklyanalysis of average feed intake (kg) of calves

犊牛腹泻次数是统计犊牛在试验期内平均发生“ 4” 级轻度腹泻和“ 5” 级严重腹泻的次数进行数据分析, 其分析结果如表7所列。

表7

Table 7

表7(Table 7)

表7 犊牛腹泻次数分析结果 Table 7 Incidence of diarrhea incalves 处理 Treatment 腹泻次数Diarrhea times 等级“ 4” 轻度腹泻次数 Frequency of level “ 4” mild diarrhea 等级“ 5” 严重腹泻次数 Frequency of level “ 5” severe diarrhea 试验组Experimental group 8.75± 0.72B 0.25± 0.44b 对照组Control group 12.25± 0.85A 0.75± 0.72a

表7 犊牛腹泻次数分析结果 Table 7 Incidence of diarrhea incalves

试验组比对照组犊牛发生“ 4” 级轻度腹泻少3.5次, 差异极显著(P< 0.01); 发生“ 5” 级严重腹泻试验组比对照组犊牛少0.5次, 差异显著(P< 0.05)。

试验组与对照组犊牛在0日龄体重、体高、体长、胸围、腹围、管围差异均不显著(P> 0.05), 至70日龄两组之间各项数据差异均为极显著(P< 0.01)。说明试验组与对照组犊牛在试验期内均进行着快速的生长, 而且试验组犊牛的生长速度快于对照组犊牛, 使得试验组犊牛各项指标均在不同时间与对照组犊牛差异显著(P< 0.05)。

断奶后, 试验组与对照组犊牛的腹围变化均大于其他时段。这表明犊牛在这一时段, 采食饲料由牛奶和固体饲料变为单一固体饲料, 维持自身所需的能量均由固体饲料提供, 致使犊牛大量采食固体饲料, 促进犊牛瘤胃的快速发育, 使得犊牛腹围快速增长^[3]。

在70 d的试验期内, 试验组犊牛的平均增重为60.55 kg, 对照组犊牛的平均增重为54.40 kg, 试验组犊牛高于对照组6.15 kg。这表明试验组犊牛获得了更高的营养水平, 使其拥有较快的生长速度。证明牛至精油具有促进营养物质消化吸收, 提高饲料利用率的作用。并且牛至精油强烈的抑菌作用会抑制有害微生物的繁殖, 减少营养成分的消耗, 使更多的营养物质用于犊牛生长, 这与传统的饲用抗生素的作用效果是一样的^[23]。

试验组与对照组犊牛在0日龄血清总蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M差异均不显著(P> 0.05), 2日龄时由于犊牛饲喂初乳获得被动免疫, 免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)浓度均大幅提高, 但差异不显著(P> 0.05), 此后由于犊牛免疫器官发育尚未完全, 不能自我产生免疫球蛋白, 3种免疫球蛋白浓度持续降低, 并在28日龄时降到最低值, 28日龄后犊牛免疫逐渐开始主动免疫, 免疫球蛋白浓度开始逐渐升高, 到70日龄时各项数据差异均为极显著(P< 0.01)。

在70 d的试验周期内, 试验组与对照组犊牛血清总蛋白(TP)在42日龄差异极显著(P< 0.01), 免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)在28日龄均差异极显著(P< 0.01)。试验组犊牛比对照组犊牛的免疫球蛋白浓度高, 说明试验组犊牛较对照组犊牛拥有更好的免疫力, 证明试验组犊牛获得了更好地营养水平, 使得其拥有较高的代谢水平和免疫力^{[3, 24]}。表明牛至精油具有提高犊牛免疫力的作用。

试验组犊牛平均采食量在8-14日龄时开始显著高于对照组犊牛(P< 0.05), 至70日龄试验结束时试验组犊牛和对照组犊牛采食量都急剧增加, 但试验组犊牛平均采食量极显著高于对照组犊牛(P< 0.01)。在试验期内试验组犊牛腹泻发生次数也显著少于对照组犊牛, “ 4” 级轻微腹泻(P< 0.01)、“ 5” 级严重腹泻(P< 0.05)均显著少于对照组。表明牛至精油同饲用抗生素一样在抑制有害微生物繁殖后降低了犊牛腹泻次数^{[19, 25]}, 使得犊牛消化系统更加健康, 有利于采食量的增加。