以槐叶决明( Cassia sophera)“茶肥1号”为材料,采用盆栽法研究了不同浓度(0、5、10、20、40、80、120、160 mg·kg-1)镉(Cd)胁迫对“茶肥1号”生长及Cd吸收积累特性的影响。结果表明:土壤中添加0~160 mg·kg-1Cd,随Cd胁迫浓度的增加,各器官生长量受到明显抑制。“茶肥1号”各器官Cd含量与Cd胁迫浓度、土壤有效态Cd含量均呈显著正相关关系( P<0.05),各器官Cd积累量顺序为根>茎>叶。土壤中Cd元素大部分被根固定,向地上部运输的比例较低,说明“茶肥1号”植株根部最易受到Cd毒害。随着Cd浓度的增加,“茶肥1号”的种子Cd累积量增加缓慢。本研究在较高的Cd胁迫浓度条件下,“茶肥1号”在较短的时期内对Cd具有明显的富集作用,其根、茎、叶中浓度分别为113.85、20.15、7.00 mg·kg-1。因此,“茶肥1号”可作为土壤修复类的植物,在污染地区种植,对环境保护与田地污染治理有重要的意义。
The growth, absorption, and accumulation of Chafei 1# ( Cassia sophera) under different cadmium (Cd) concentrations (0, 5, 10, 20, 40, 80, 120, 160 mg·kg-1) were investigated using the pot experiment. The results showed that upon adding 0~160 mg·kg-1 Cd in soil, the growth of various organs were significantly inhibited along with increasing concentrations of Cd. There were significant positive correlations between Cd content in organs and Cd stress, and Cd content in organs and available Cd content ( P<0.05). The order of Cd content in various organs was root>stem>leaf; in addition, most of the Cd was fixed by the roots in the soil, so less Cd was transported from the soil to the upper part, indicating that the roots of Chafei 1# were vulnerable to Cd toxicity. Although the Chafei 1# was treated with a high concentration of Cd, in a short time, there was an obvious enrichment in Cd as Cd stress increased, as the content in the root, stem, and leaf were 113.85, 20.15, and 7.0 mg·kg-1, respectively. Therefore, Chafei 1# could be planted in polluted areas as soil remediation plants, which are of great significance to environmental protection and in control measures for polluted cultivated land.
镉(Cd)是植物生长发育的非必需元素, 较低浓度即可对作物产生较大危害[1]。Cd在环境和植物中的迁移性和生物毒性较强, 由于其稳定、积累和不易清除等特性, 进入土壤中易被植物吸收, 并通过食物链进入人体, 可在人体内不断富集, 严重威胁人们身体健康与生命安全, 与其相关的致病、致畸、致癌等报道日益增多[2, 3, 4]。研究表明, 排到环境中的Cd有82%~94%进入土壤, 其中包括农作物的耕地土壤[5]。在我国, 因Cd含量超标大面积的耕地被迫弃耕与转型[6]。茶叶作为我国的一种重要的经济作物, 因具有较强的保健功能而深受广大人民喜爱。但近年来, 随着生活水平的不断提高, 包括茶叶在内的食品安全问题越来越受到人们关注, 因此, 茶园中的重金属污染问题目前已受到高度重视。前人研究表明, 随着时间的推移和社会经济的发展, 茶叶中Cd含量增加了近一倍, Cd含量超标问题呈显著升高趋势[7, 8]。因而, 研究茶园土壤Cd污染的修复与治理具有重要的理论和实践意义。
在众多植物中, 豆科植物如花生(Arachis hypogaea)[9]、大豆(Glycine max)[10]等对重金属Cd具有较强的耐受性和较高的富集能力, 而且不同品种间的耐受性和富集能力差异明显。槐叶决明(Cassia sophera)“ 茶肥1号” 为湖南省茶叶研究所自主选育的一种旱地夏季绿肥植物, 为豆科决明属一年生亚灌木草本植物, 耐酸性, 适合在茶园中种植, 由于其氮含量, 产草量较决明属绿肥圆叶决明高等特点[11], 已在我国茶区广泛种植。“ 茶肥1号” 对矿质元素P、K的吸收能力较强[12]。决明属绿肥圆叶决明(Chamaecrista rotundifolia)能忍耐2 mg· kg-1以下的Cd胁迫, 可作为南方红壤地区矿山Cd污染土壤的生态修复植物类型[13]。因此决明属的“ 茶肥1号” 可能对镉离子等重金属具有富集作用, 该植物能否降低重金属污染的土壤或者茶园中Cd的含量, 目前研究较少。为此, 本研究拟通过高浓度Cd处理盆栽“ 茶肥1号” 植株, 通过“ 茶肥1号” 生长及Cd含量的积累情况来探讨“ 茶肥1号” Cd累积特性, 为Cd污染茶园及其他农作物种植地区土壤治理与修复提供参考。
以“ 茶肥1号” 为供试材料, 于2016年4月在湖南省茶叶研究所长沙市马坡岭试验基地布置盆栽试验。盆钵直径40 cm, 高度35 cm, 土壤取自长沙市马坡岭茶叶试验基地(113° 07.476' E, 28° 20.511' N), 砂质红壤, 有机质9.65 mg· kg-1, pH 5.46, 碱解氮64.73 mg· kg-1, 速效磷4.6 mg· kg-1, 速效钾109.1 mg· kg-1, 总Cd含量0.46 mg· kg-1。土壤经风干、去杂质、压碎后过2 mm孔径筛, 每盆按14.5 kg 称重装盆。采用田间常规管理“ 茶肥1号” , 2016年11月结束试验, 历时8个月。
“ 茶肥1号” 于4月20日播种, 选取长势一致的5叶龄幼苗于5月27日移栽于盆钵中, 每盆栽种3株, 6月7日按 0(CK)、5、10、20、40、80、120、160 mg· kg-1进行Cd处理, 分别记为 CK、Cd1、Cd2、Cd3、Cd4、Cd5、Cd6、Cd7, 共8个处理, 每处理4盆。以硝酸镉[Cd(NO3)2· 4H2O]溶于水作为Cd供源, CK、Cd1、Cd2、Cd3、Cd4、Cd5、Cd6、Cd7分别补充尿素0.45、0.44、0.42、0.39、0.34、0.23、0.11和0 g平衡氮元素含量。
取样:在Cd胁迫50 d(2016年7月27日)时, 取出植株清洗后, 按根、茎、叶片分别取样。各样品经蒸汽杀青固定后, 置于烘箱中80 ℃干燥后称重, 测定各处理的生长量, 再粉碎过筛备测。在Cd胁迫163 d(2016年11月17日)时, 收获果荚, 取出植株的根清洗后, 分别经蒸汽杀青固定后, 于80 ℃烘箱中干燥后, 分选出种子, 再把种子、根粉碎过筛备测。同时取各处理土壤样品风干碾碎后过筛备用。
测定:“ 茶肥1号” 各器官及土壤中有效态Cd含量的测定参照GB/5009.15-2014, 将各样品经硝酸、高氯酸消解后用原子吸收光谱仪(岛津 AA-6300C)测定。然后计算吸收系数[14, 15](absorbtion coefficient, AC)和富集系数[16]。
AC= 某器官中Cd元素含量/根系Cd元素含量。
富集系数=植物体或某器官中Cd元素的含量/Cd元素在土壤中的含量。
利用DPS14.5软件对所测数据进行统计与分析, 用平均值和标准误表示测定结果, 对各处理测定结果采用Duncan新复极差法进行多重比较分析。采用线性回归对“ 茶肥1号” 各器官的Cd累积量与Cd处理浓度间、土壤有效Cd含量的相关性进行分析, 利用Excel 2010软件进行制图。
研究结果表明, 在处理后2个月内, 随着处理浓度的增加, “ 茶肥1号” 逐渐出现植株矮小、分枝减少的中毒症状。随着胁迫时间的延长, 120和160 mg· kg-1Cd处理出现死苗现象, 其他处理生长基本正常, 但生长势明显弱于对照。Cd胁迫对“ 茶肥1号” 的叶、根影响较茎大, 20 mg· kg-1(Cd3)处理时, 根系、叶片生长量显著(P< 0.05)低于对照组; 40 mg· kg-1(Cd4)处理时, 茎的生长量较对照组显著降低(P< 0.05), 表明“ 茶肥1号” 生长已受到明显的抑制(表1)。“ 茶肥1号” 对外源Cd较敏感, 随Cd胁迫浓度的增加, “ 茶肥1号” 各器官生长量均受抑制, 160 mg· kg-1(Cd7)处理组受到的抑制作用最强, 与对照组比较, 其根、茎和叶片的生长量分别下降了69.42%、45.47%和47.96%。
“ 茶肥1号” 根、茎、叶的Cd积累量均随Cd处理浓度的增加呈现升高趋势(表2)。Cd处理浓度达160 mg· kg-1时, 根、茎和叶片的Cd含量分别是对照的91.08、36.63、14.00倍。各器官Cd积累量高低顺序为根> 茎> 叶。根对Cd的吸收积累量为茎的2~6倍、叶片的3~16倍, 与根系的积累量相比, Cd向地上部分迁移的量相对较少。
吸收系数AC反映了“ 茶肥1号” 各器官对Cd的相对吸收程度。以根为参比器官, AC值呈先升高再下降趋势, Cd浓度按梯度逐渐升高至10 mg· kg-1, 叶的AC值逐渐升高, 20~160 mg· kg-1时, 叶的AC值又逐渐降低(表3); 当Cd质量浓度按梯度逐渐升高至40 mg· kg-1时, 茎的AC值逐渐升高, 80~160 mg· kg-1时, 茎的AC值又逐渐降低。表明Cd胁迫浓度达到一定值后, 随着浓度的进一步加大, “ 茶肥1号” 各器官对Cd的相对吸收能力明显变弱。
随着Cd胁迫处理浓度增加, 土壤中有效Cd含量显著增加(图1)。“ 茶肥1号” 不同器官对Cd的吸收存在明显差异, 各器官的生物富集系数表现为根> 茎> 叶, “ 茶肥1号” 根、茎、叶分别在处理浓度为Cd4(40 mg· kg-1)、Cd2(10 mg· kg-1)、Cd1(5 mg· kg-1)时, 富集系数分别为0.835、0.868和0.967, 表明向地上部分输送的Cd多(表4)。
“ 茶肥1号” 各器官Cd含量(y)与Cd胁迫浓度(x1)、土壤有效态Cd含量(x2)均呈显著正相关(P< 0.05), 表明土壤中有效态Cd向“ 茶肥1号” 迁移是各器官所积累Cd的主要来源(表5)。拟合曲线的斜率反映了“ 茶肥1号” 对土壤中Cd吸收程度的大小, 各器官Cd含量与Cd胁迫浓度和土壤有效态Cd含量的浓缩系数均为根> 茎> 叶。综合可知, “ 茶肥1号” 根对Cd的吸收能力最强, 且其增强趋势稳定。
为了研究“ 茶肥1号” 种子对Cd是否具有积累效应, 能否在Cd污染地进行“ 茶肥1号” 种子繁育, 对收获后“ 茶肥1号” 的种子Cd含量进行了测定。当处理浓度达到Cd2(10 mg· kg-1) 时, 收获后“ 茶肥1号” 根、种子中的Cd含量较对照显著增加, 但种子中的Cd含量在处理浓度Cd5(80 mg· kg-1)以上后累积量增加减缓, 处理浓度达160 mg· kg-1时, 种子的Cd含量增加了30.3%, 而根部Cd含量增加了2.49倍, 同一浓度处理, “ 茶肥1号” 根中Cd含量是种子的2.7~35.9倍(P< 0.05)(见表6)。
Cd是重金属污染中较危险的元素之一, 易于被植物吸收、富集, 过量的Cd严重影响植物的生长发育[17, 18]。研究表明, Cd胁迫会对植物的株高、生物量等性状指标产生一定的抑制作用[19, 20, 21]。本研究结果表明, 与对照比较, 土壤中施入5~160 mg· kg-1的外源Cd, 当Cd浓度为5~80 mg· kg-1时, “ 茶肥1号” 无明显的Cd过量症状出现, 120 mg· kg-1浓度以上处理“ 茶肥1号” 出现死苗, 可能由于少部分“ 茶肥1号” 幼苗在移栽时根部受损, 浓度过高导致其死苗。植物根系是重金属富集最高的部位[22], 本研究发现Cd处理后各器官生长量显著下降, 其中对根的影响最大(表1), 当Cd浓度达到160 mg· kg-1时, 根的生物量下降了69.42%。
本研究结果表明, 在较高的Cd胁迫浓度条件下, “ 茶肥1号” 在较短的时期内对Cd具有明显的富集作用。“ 茶肥1号” 各器官Cd含量与Cd胁迫浓度、土壤有效态Cd含量均呈显著正相关关系(P< 0.05)。各器官Cd积累量高低顺序为根> 茎> 叶(表2); 吸收系数与生物富集系数亦表现为根> 茎> 叶(表4)。这主要是由于根系对Cd的富集作用较强, Cd在植物根部的大量积累且大部分被固定, 向地上部分运输比例较低, 可减轻Cd对整个植株的毒害, 这是植物对Cd胁迫的一种耐受方式[22]。因此茎、叶中Cd含量与吸收系数显著低于根部, 同时也导致其受到Cd胁迫的影响也最大。这与王春梅等[15]、赵鲁等[16]对茶树(Camellia sinensis)进行的研究结果一致。随着生育期的延长, 各处理组根的Cd累积量稳定增加, Cd6(120 mg· kg-1)浓度处理组在收获时根的Cd积累量较生物量测量时增加最多, 达61.78%, 而Cd7(160 mg· kg-1)浓度处理组只增加了30.52%。该结果一方面可能是Cd6处理浓度较Cd7浓度低, Cd6处理组的生长势较Cd7组好(表1), 并且Cd6处理组的富集系数较Cd7大(表4), 使得Cd6处理组生长后期能够吸收的Cd较多; 另一方面可能是由于Cd7处理组的浓度较高, “ 茶肥1号” 在生长前期根积累Cd较多, 更接近其本身潜在的Cd富集饱和量, 其吸收速率下降从而使得后续吸收减慢。
本研究中各处理种子的Cd累积量较叶片低, Cd浓度处理160 mg· kg-1时, 其累积量仅为4.3 mg· kg-1(表6), 对于Cd污染较严重的地区, “ 茶肥1号” 能正常生长, 其繁育的种子可用于污染地的连年种植以修复土壤。对于Cd污染较轻的荒地, 可以通过连续几年种植“ 茶肥1号” 改善土壤后再种植茶树或者其它作物。“ 茶肥1号” 产草量高, 是决明属绿肥圆叶决明的5倍, 本研究经Cd处理之后, 其产草量仍然可观。因此, “ 茶肥1号” 可像Shit和Cai[9]的研究结果一样, 在Cd污染地区种植, 一方面可用来改良土壤地力, 另一方面可用于对污染地区土壤修复与环境治理。
(执行编辑 苟燕妮)
The authors have declared that no competing interests exist.
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